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cloning
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最新回复：2019年10月18日 8点23分 PT
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mustbeit
4 年多
楼主 (未名空间)
我在做cloning。clone一个特异在某cell表达的isoform. 用的specific real time
PCr primer picked up 5'seq.检测表达很高。protein level too. 可是，pick up 全长时却没有 pcr product。pcr条件已经降的很低。 就是没有product。我怀疑末尾3' end 比给的seq短了。 请教有经验的高人该如何进行。thx
D
Dacong
4 年多
2 楼
做一下RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends)? 然后重新设计primer？
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我在做cloning。clone一个特异在某cell表达的isoform. 用的specific real time
PCr primer picked up 5'seq.检测表达很高。protein level too. 可是，pick up 全长时却没有 pcr product。pcr条件已经降的很低。 就是没有product。我怀疑末尾3' end 比给的seq短了。 请教有经验的高人该如何进行。thx
做一下RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends)? 然后重新设计primer？