【 在 bentian (朴素的本田) 的大作中提到: 】 最近有一个很好的想法想要做,但是要求携带目的DNA的病毒能够很好地感染组织,试 过非常多的方法,都无法看到有效的感染。 我试过lentivirus (滴度在10^6),不同种类的AAV(滴度在10^11);试过用强免疫抑 制剂处理小鼠;试过用裸鼠来操作病毒感染,效果均很差(只有<10 细胞被感染。)。="" br="">: 病毒需要维持目的基因表达在一两个月左右即可。这个病毒体内感染组织的效率很低使 我的课题无法进行。版上若有熟悉这个领域的版友指点一二,定会感激不尽(散尽伪币 ,尽管知道大家都不用了)。 期待在版友的指导下走过这个瓶颈,谢谢谢谢!
【 在 jessecai (jesse) 的大作中提到: 】 什么组织?
【 在 bentian (朴素的本田) 的大作中提到: 】 皮肤
【 在 jessecai (jesse) 的大作中提到: 】 皮肤用lenti很容易感染 不过老鼠的皮肤比较薄 注射有点难度 你的lenti滴度不高啊 没有超离心吧
【 在 bentian (朴素的本田) 的大作中提到: 】 滴度有1X10^7/ml,经过了10倍浓缩。 能感染上皮不? 啊
【 在 vicillibra (vicillibra) 的大作中提到: 】 病毒有效感染组织细胞的前提之一,是该细胞表面有足够的受体表达。 已知某些短肽能够特异性靶向某些组织细胞,因此,可以考虑将该短肽的编码基因和你 的目的基因融合到一起(中间用序列隔开)。这种修饰过的病毒,也许会增强感染效率 。
过非常多的方法,都无法看到有效的感染。
我试过lentivirus (滴度在10^6),不同种类的AAV(滴度在10^11);试过用强免疫抑
制剂处理小鼠;试过用裸鼠来操作病毒感染,效果均很差(只有<10 细胞被感染。)。="" br="">
病毒需要维持目的基因表达在一两个月左右即可。这个病毒体内感染组织的效率很低使我的课题无法进行。版上若有熟悉这个领域的版友指点一二,定会感激不尽(散尽伪币,尽管知道大家都不用了)。
期待在版友的指导下走过这个瓶颈,谢谢谢谢!
能感染上皮不?
非易感组织/细胞是很难被感染的,
嵌入新DNA/RNA 后,病毒的感染力会变弱或丢失的。
已知某些短肽能够特异性靶向某些组织细胞,因此,可以考虑将该短肽的编码基因和你的目的基因融合到一起(中间用序列隔开)。这种修饰过的病毒,也许会增强感染效率。
用gene-gun 或 transfection。
不知道你感兴趣的是哪种细胞 下面这篇文章用的是intradermal injection
Intradermal Injection of Lentiviral Vectors Corrects Regenerated Human
Dystrophic Epidermolysis Bullosa Skin Tissue in Vivo
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