不是试纸 是RTPCR 试剂盒 woaixiaodi 发表于 2/1/2020 6:23:23 PM
试剂盒只是用来采样的，还是要送回实验室做pcr 从抽dna到pcr至少3小时，还不知道实验室是用automation的还是用手做的 Baguette 发表于 2/1/2020 6:49:49 PM
试剂盒只是用来采样的，还是要送回实验室做pcr 从抽dna到pcr至少3小时，还不知道实验室是用automation的还是用手做的 Baguette 发表于 2/1/2020 6:49:49 PM 采样是唾液吗
做RT-PCR检测的话是需要时间和专业技术员的。我日常工作的一部分就是用RTPCR检验RNA病毒（HIV）。我不在医院实验室，是科研实验室，但用的是最快的试剂盒。我觉得医院不会更快了。 整个时间如下： 1. 取出冰箱里已经完全预备好的血清样品，室温解冻，期间准备需要新鲜配置的提前RNA制剂，共约10分钟。血清是我头天在老鼠身上取得并且已经分装好的，所以不计算在取样和运输的时间内。医院需要加上这个时间 2. 开始提取RNA。由于实验室离心机的限制，所以一次最多提24个样品。而且由于提取过程中步骤繁多，想2批样品同时提取的来节省时间的意义不大。这个过程大概1-1.5小时。提取的RNA冰上待用。 3. 配置新鲜的RT-PCR试剂，各种对照样品，标准曲线对照组样品，差不多30分钟吧。 4. 往96孔板加样，一般来说要每个样品要加三孔来避免误差。这样一个96孔板顶多也就是测24个样品，因为还要加各种对照。加样也差不多30分钟 5. 上PCR仪器，96孔板放上去，机器上输入各个样品编号，确认各个步骤设置正确。大概15分钟 6. 开始run，根据试剂盒和机器的不同，过程1-2.5小时。 7. 数据分析，这个快，20分钟吧，但要弄漂亮一点再额外加时间 所以我基本上9:30开始干，不停手，1点样品上机器我去吃午饭，2点回来提取数据，3点左右上交分析结果。 我们用的是最快的RNA提取试剂盒和RT-PCR一步试剂盒，尤其是后者，如果是两步试剂盒的话至少要2.5小时。而且我们没有做内参，否则工作量加倍。所以我很能理解检验期长和医院人手不够。
回复 18楼superfans711的帖子 所以是说，六小时能测一个病人？
控制试纸就控制了确诊病例，就控制了病床，控制了免费治疗的费用，控制了上报数字，控制了舆论。其它的都叫疑似病例，那些人的命，是连数字都算不上的。 zyhbwh 发表于 2/1/2020 6:10:02 PM
做RT-PCR检测的话是需要时间和专业技术员的。我日常工作的一部分就是用RTPCR检验RNA病毒（HIV）。我不在医院实验室，是科研实验室，但用的是最快的试剂盒。我觉得医院不会更快了。整个时间如下：1. 取出冰箱里已经完全预备好的血清样品，室温解冻，期间准备需要新鲜配置的提前RNA制剂，共约10分钟。血清是我头天在老鼠身上取得并且已经分装好的，所以不计算在取样和运输的时间内。医院需要加上这个时间2. 开始提取RNA。由于实验室离心机的限制，所以一次最多提24个样品。而且由于提取过程中步骤繁多，想2批样品同时提取的来节省时间的意义不大。这个过程大概1-1.5小时。提取的RNA冰上待用。3. 配置新鲜的RT-PCR试剂，各种对照样品，标准曲线对照组样品，差不多30分钟吧。4. 往96孔板加样，一般来说要每个样品要加三孔来避免误差。这样一个96孔板顶多也就是测24个样品，因为还要加各种对照。加样也差不多30分钟5. 上PCR仪器，96孔板放上去，机器上输入各个样品编号，确认各个步骤设置正确。大概15分钟6. 开始run，根据试剂盒和机器的不同，过程1-2.5小时。7. 数据分析，这个快，20分钟吧，但要弄漂亮一点再额外加时间所以我基本上9:30开始干，不停手，1点样品上机器我去吃午饭，2点回来提取数据，3点左右上交分析结果。我们用的是最快的RNA提取试剂盒和RT-PCR一步试剂盒，尤其是后者，如果是两步试剂盒的话至少要2.5小时。而且我们没有做内参，否则工作量加倍。所以我很能理解检验期长和医院人手不够。 superfans711 发表于 2/1/2020 8:02:38 PM
我希望美国有试纸，可以快速测。 oceanmist 发表于 2/1/2020 8:29:23 PM
回复 18楼superfans711的帖子所以是说，六小时能测一个病人？ woolala1202 发表于 2/1/2020 8:22:07 PM <img src="[url=http://forums.huaren.us/images/common/back.gif"/>]http://forums.huaren.us/images/common/back.gif"/>[/url]
回复18楼 superfans711 的帖子 所以是说，六小时能测一个病人？ woolala1202 发表于 2/1/2020 8:22:00 PM
不是，他这个是LAB， 不是CDC, 或者医院的流程。 另外，最普通的RT机器 ，一次最少可以检测384个样品。 mindstorm 发表于 2/1/2020 8:46:00 PM
医院很多用automation extraction一般一个小时搞定，一次最多可以做96个 Baguette 发表于 2/1/2020 8:25:00 PM
好像是喉部swab，这种swab一般采样完会放在buffer或者破解细胞的溶液里储存和运输 Baguette 发表于 2/1/2020 8:01:15 PM
回复 18楼superfans711的帖子赞科普！完全不懂。只是有些好奇，是不是有很多种不同的病毒性肺炎（我知道还有Sars, 其它的不知道)，而它们都可导致肺部CT图像是那种的, 因此仅从CT图不能确认是否就是这种新病毒导致的肺炎？ lyksj 发表于 2/1/2020 8:40:38 PM
不，按我的做法能测24个。 superfans711 发表于 2/1/2020 8:50:00 PM
但是按照你说的，上机器也就一个小时，剩下的是人工准备，那么可以多人准备，机器不停跑，相当于每小时24个sample，一天24*24=576，10台机器就是5000+。 大菠萝小菠萝 发表于 2/1/2020 11:11:00 PM
但是按照你说的，上机器也就一个小时，剩下的是人工准备，那么可以多人准备，机器不停跑，相当于每小时24个sample，一天24*24=576，10台机器就是5000+。 大菠萝小菠萝 发表于 2/1/2020 11:11:54 PM
PCR仪器大一点的学校生物相关的lab都有，又不是sequencing equipment，普及率应该很高，而且primer design出来之后生产也很快，但是如果只是定点医院测试可能就是人手不足。试剂盒本身不应该大规模的缺失。 tonycry 发表于 2/1/2020 11:57:00 PM
能详细介绍一下这个试剂盒里有什么怎么用吗？不懂PCR
采样是唾液吗
好像是喉部swab，这种swab一般采样完会放在buffer或者破解细胞的溶液里储存和运输
医院很多用automation extraction一般一个小时搞定，一次最多可以做96个
不是一个，是一批，一批最多96个再去掉几个control。有更高通量的digital pcr，但那种生产chip就需要花时间，而且成本更高，从timeline来说应该就是用的普通rt pcr
我希望美国有试纸，可以快速测。
我只做过植物的pcr， 知道很慢， 也能理解。这次这个病毒真的是太难弄了， 潜伏期长， 传播速度快， 测试有慢，短期产生大量病患给测试造成很大压力。 不知道日本怎么那么快就出结果了， 美国还是慢些。 单纯指责中国故意拖慢，我觉得没必要，感觉国内现在也在尽量测。
负责任的讲美国特别慢
要好几天
上个月我爸有肺炎的时候 就测试各种传染病
都要戴口罩好几天 我完全能理解在医院里面一直戴口罩的难受
赞科普！
完全不懂。只是有些好奇，是不是有很多种不同的病毒性肺炎（我知道还有Sars, 其它的不知道)，而它们都可导致肺部CT图像是那种的, 因此仅从CT图不能确认是否就是这种新病毒导致的肺炎？
不是，他这个是LAB， 不是CDC, 或者医院的流程。
另外，最普通的RT机器 ，一次最少可以检测384个样品。
今天跟lg说试纸，lg说不是kit还没做出来吗？我想了想说那大概是pcr，网上说人家医院两个小时出结果，lg说我看论坛里转载的新闻看傻了，采集样品，提取rna到pcr再到出报告怎么可能两个小时。。。。我想了想也是。。。然后他不让我看这些新闻了。。。
谢谢答疑解惑
谢谢专业回答。 不喜欢哪种阴谋论。 理解一线的医务工作者。
这个专业。能做PCR基因测序的很少，需要仪器和人员，不是试纸。我们一个大985 高校，虽然有这个仪器但是忙不过来，研究生生物相测PCR都是零下80 度保存送到上海去测。
目前CT照出来的都只能是疑视，只有从病人样本中经过PCR基因测序确实有冠状病毒才确诊。
但是按照你说的，上机器也就一个小时，剩下的是人工准备，那么可以多人准备，机器不停跑，相当于每小时24个sample，一天24*24=576，10台机器就是5000+。
人工也不是随便拉个人来就行的啊，也要培训啊
看看美国这检验速度，恐不恐慌
bsl3及以上实验室才有资格做这个吧。。。bsl2都不是的实验室有pcr也没用的。。。
这些现在都是自动化了，包括前面核算rna分离也是自动化的，但是再自动化也要花时间，另外出来数据还要分析一下才能出结果（当然不是跑胶了）